于化妝品功效評價的皮膚細胞類型介紹?《化妝品功效宣稱評價指導原則》起草說明

皮膚細胞培育技術可模擬人體內的生理環境，研討細胞與細胞之間的反響，細胞與間質之間的反響等，具有快速、經濟的特點，既可用來毒性剖析，也可停止成效評價，是保證化裝品平安、有效的必要手腕，為皮膚生理學等提供了技術基礎。

一、人永生化角質細胞（Human immortalized keratinocytes，HaCaT 細胞）

角質構成細胞（KC）的體外培育技術曾經十分成熟，其生長較快、細胞存活率較高，但也易老化且傳代次數較少，所以在化裝品成效評價中通常會運用HaCaT細胞（即非腫瘤來源的永生化人正常皮膚的KC株，與KC分化特性相似，具有易于培育、傳代次數多的優點）。

1、HaCaT細胞運用于保濕成效評價

HaCaT細胞可分解透明質酸（Hyaluronic acid，HA）、水通道蛋白（Aquaporin，AQP）、嚴密銜接蛋白（Tightjunction protein，TJP）以及絲聚蛋白（Filaggrin，FLG）等與皮膚保濕相關的生物分子。因此，可以經過檢測化裝品原料對HaCaT細胞中AQP、claudin-1（claudin-1是TJP中構成表皮細胞旁屏障的主要跨膜蛋白）和FLG等保濕相關蛋白含量的影響來反映其保濕才干，對保濕化裝品停止成效評價。

不過如今停止保濕成效測試普通會經過人體實驗的方法，這樣更直觀一些，HaCaT細胞測試可用于研討原料的保濕機理。

2、HaCaT細胞運用于抗氧化成效評價

活性氧（ROS）過量會對DNA和蛋白質發生氧化損傷；丙二醛（MDA）是生物體內自在基作用于脂質發作過氧化反響的終產物。因此，經過檢測其中HaCaT細胞內ROS和MDA的含質變化可反映出細胞內氧化應激的水平， 評價化裝品原料的抗氧化才干。

超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPX）可用于用于肅清或降低氧自在基形成的損傷。因此，經過檢測SOD、CAT和GSHPX的生機，可反映化裝品原料對HaCaT細胞內自在基的肅清才干的影響，以此來評價化裝品原料的抗氧化才干。

例如，王茵等人經過測量小鼠肝臟組織的抗氧化酶系統活性（SOD，GSHPX，AOC（總抗氧化才干），MDA，NO（一氧化氮））來研討蝦青素的抗氧化效果。*終結果顯示蝦青素可提高小鼠肝臟和血液中的SOD，GSHPX，AOC等活性目的，降低MDA和NO的濃度，即蝦青素具有抗氧化才干。

二、小鼠B-16黑色素瘤細胞（簡稱B-16細胞）

黑素細胞（Melanocyte，MC）是皮膚內的一種特殊細胞，它位于表皮的基底層，細胞內的黑素小體（Melanosomes）能分解黑色素（Melanin），并轉移到周圍的角質構成細胞中，為皮膚提供顏色。但是黑素細胞的增殖比擬緩慢，所以常用B-16細胞替代黑素細胞停止細胞實驗。（B-16細胞在基本結構與黑色素分解功用方面與人黑素細胞基本相反，且增殖才干更強，可以屢次傳代，適宜用于實驗研討）。

B-16細胞可運用于美白成效評價，例如馬佳等研討了壬二酸對人表皮黑素細胞和鼠黑素瘤B16細胞黑素分解的影響。與空白對照組比擬? 0.1 mmol//L壬二酸即顯示抑制人表皮黑素細胞的酪氨酸酶活性和黑素的分解，同等濃度的壬二酸對鼠黑素瘤B16細胞的酪氨酸酶活性和黑素分解也有抑制造用。

三、人皮膚成纖維細胞（Human skin fibroblast，HSF）

HSF是皮膚真皮層中*主要的細胞，關于維持皮膚的彈性和張力具有重要的作用。HSF具有很強的蛋白質分解才干，可以分解并分泌少量彈性蛋白、膠原蛋白、糖胺多糖和糖蛋白等基質成分，進而生成彈性纖維、膠原纖維和網狀纖維，分泌多種細胞修復因子，使得皮膚具有弱小的更新與自我修復才干。

人皮膚成纖維細胞可運用于抗衰老成效評價，例如鄭雯等研討了白藜蘆醇對UVB照射的人皮膚成纖維細胞基質金屬蛋白酶（MMP-1）水平及細胞凋亡的影響，即白藜蘆醇對紫外線照射皮膚的光維護作用。結果標明白藜蘆醇能經過抑制UVB照射所形成的人皮膚成纖維細胞MMP-1水平增長，使皮膚真皮組織膠原蛋白的分解增加，從而延緩紫外線照射對皮膚形成的損傷和老化進程。

四、人角質構成細胞（HKC）

人角質構成細胞系一種能分解角質蛋白的上皮細胞。此類細胞為表皮的主體，由表皮深層始逐漸增殖、分化，并不時向表層移行，其間可分紅幾個層次，表皮*深層為基底層，向上依次為棘層、顆粒層、角質層，角質蛋白亦依生長層次逐漸分解。

人角質構成細胞是表皮中*重要的細胞之一，它可以反映表皮的安康形狀，所以也有少量的研討人員將它運用于化裝品原料的研討與運用，例如王剛等經過實驗證明阿魏酸是經過影響HKC下游炎癥因子如TNF-α和IL-8分泌，從而參與調理免疫反響的信號傳導機制，到達對HKC的維護作用。

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參考資料：

[1] 郭立群. 化裝品成效評價(Ⅶ)-細胞生物學在化裝品成效評價中的運用. 日用化學工業. 2018.

[2] 馬宇晨. 用于化裝品成效評價的皮膚細胞類型、特點及運用概略. 日用化學工業. 2021.

[3] 關英杰. 皮膚細胞培育技術在化裝品成效研討中的運用. 日用化學工業. 2002.

[4] 王茵. 自然蝦青素的抗疲勞及抗氧化作用研討. 西南大學學報（自然迷信版）. 2015.

[5] 馬佳. 壬二酸對人黑素細胞和鼠黑素瘤B16細胞黑素分解功用的影響. 安徽醫科大學學報. 2006.

[6] 鄭雯. 白藜蘆醇對UVB照射的人皮膚成纖維細胞MMP-1水平及細胞凋亡的影響. 中國皮膚性病學雜志. 2012.

[7] 王剛. 阿魏酸對人角質構成細胞的維護作用. 醫藥導報. 2011.

《化裝品成效宣稱評價指點準繩》

起草說明

為規范和指點我國化裝品成效宣稱的評價任務，配合《化裝品監視管理條例》的實施，國度藥品監視管理局組織起草了《化裝品成效宣稱評價指點準繩》（征求意見稿）（以下簡稱“指點準繩”）。現就起草任務的有關狀況說明如下：

一、必要性

依據《化裝品監視管理條例》第二十二條的要求，化裝品的成效宣稱應當有充沛的迷信依據，且化裝品注冊人、備案人應當在國務院藥品監視管理部門規則的專門網站發布成效宣稱依據的相關資料，接受社會監視。目前，除防曬及防曬產品的防水成效需求依據《化裝品平安技術規范》的要求停止成效評價外，并未對其他化裝品成效宣稱提出要求。

為保證消費者的合法權益，規范行業行為和促停止業安康開展，經過對現有化裝品成效宣稱評價體系、國際外評價方法及評價部門/機構的調研剖析，結合我國化裝品法規要求及行業實踐狀況，起草本指點準繩，為化裝品成效宣稱評價任務提供指點依據。

二、主要內容

（一）堅持迷信性和可行性。普遍參考歐、美、日、韓相關法規、行業/學術組織發布的成效宣稱評價方法和文獻資料的基礎上，充沛結合我國行業現狀，對化裝品成效宣稱評價的內容、范圍、責任主體、總體準繩、方法選擇和機構選擇等提出基本要求。

（二）堅持行業自律及規范性。規則化裝品注冊人、備案人應當實行其主體責任，在國度藥品監視管理局規則的網站向社會地下化裝品成效宣稱依據的摘要，經過社會監視的方式，而不是行政審批來處置成效宣稱的真實性效果。

三、需求重點說明的效果

（一）關于成效宣稱評價范圍。依據國際外對成效化裝品的分類和我國《化裝品分類規則和分類目錄》（征求意見稿）中的成效宣稱分類用語，對比研討后發現“防脫發、防曬、祛痘”等化裝品的運用風險較高，上述幾類產品有的在美國作為“OTC藥品”；或在日本作為“醫藥部外品”；或在韓國作為“醫藥外品”嚴厲管理。《指點準繩》規則了化裝品成效宣稱評價準繩，消費者可經過感官識別的，或產品經過物理作用發失效果且在標簽中明示的，可豁免提交成效宣稱評價資料。

（二）關于成效宣稱評價機構。化裝品成效宣稱評價的責任主體為化裝品的注冊人、備案人，可自行或委托具有相應才干的評價機構承當成效宣稱的評價任務。防曬、祛斑美白、防脫發和新成效應委托化裝品注冊備案檢驗機構評價和方法驗證。

（三）關于成效宣稱評價方法。評價方法可選用國際外相關法規、規范、規范規則的方法，威望組織或技術機構及行業協會指南、專業學術雜志地下宣布方法等，也可運用閱歷證的實驗室自擬方法。同一成效宣稱有多種可選擇的評價方法時，應優先選擇我國現行法律法規、國度規范或技術規范中的方法。防曬、祛斑美白、防脫發成效宣稱評價選擇《化裝品平安技術規范》以外的方法時，需停止方法驗證。

（四）關于祛斑美白成效評價交叉參照。思索到我國的行業現狀，在調研了祛斑美白成效作用機制、影響成效發揚的主要要素及祛斑美白成效評價方法的基礎上，參考防曬化裝品管理閱歷，對祛斑美白成效評價交叉參照提出準繩性要求。

（信息來源：化裝品檢定所；編發：北京天健華成國際投資顧問有限公司化裝品注冊部 http://www.zhuceabc.cn）