實(shí)驗(yàn)室霉菌檢測(cè)中罕見(jiàn)效果

霉菌：不是分類(lèi)學(xué)上的名詞，而是一些絲狀真菌的通稱(chēng)，屬真菌的一局部；其對(duì)人類(lèi)具有雙重性，有利的方面是它可以用來(lái)釀造、工業(yè)發(fā)酵、抗生素和酶制劑的消費(fèi)等，不利方面是它能惹起農(nóng)副產(chǎn)品、食品、原料及器材的腐朽，也感染并惹起人類(lèi)和動(dòng)、植物的多種疾病，少數(shù)種類(lèi)，如黃曲霉，能發(fā)生黃曲霉毒素，黃曲霉毒素是一種致癌物質(zhì)，危害人、畜的安康和生命。因此，霉菌的檢測(cè)關(guān)于食品的平安性很重要。

食品中罕見(jiàn)的霉菌：毛霉屬、根霉屬、曲霉屬、青霉屬等。

檢測(cè)中的留意事項(xiàng)：

1、 取樣的代表性。

2、 取樣工具的無(wú)菌。空氣中霉菌的孢子含量很高，所以，取樣的工具、容器等要經(jīng)過(guò)嚴(yán)厲的高壓滅菌。

3、 檢樣的方法。 (1)、由于霉菌易被攜帶，所以，檢樣時(shí)操作人員應(yīng)盡量防止自身攜帶的能夠。 (2)、樣品的均質(zhì)及充沛振搖。由于有些孢子是連成串的，故均質(zhì)和振搖能使其充沛散開(kāi)，同時(shí)，在各梯度延續(xù)稀釋時(shí)，也要用滅菌吸管重復(fù)吹吸幾次，使孢子充沛散開(kāi)。

4、培育溫度和時(shí)間。培育溫度25-28℃培育，3天后觀察，需培育觀察一周。

霉菌檢驗(yàn)中常用的培育基：孟加拉紅瓊脂、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、察氏瓊脂、高鹽察氏瓊脂等。

5、檢樣中罕見(jiàn)的效果。

(1) 不同稀釋度計(jì)數(shù)結(jié)果相反；

(2) 不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)很好連成片無(wú)法計(jì)數(shù)；

緣由： (1) 稀釋時(shí)未經(jīng)重復(fù)振搖，吹吸，招致孢子未充沛散開(kāi)，影響了計(jì)數(shù)的結(jié)果。 (2) 由于培育基不適宜，PH值高等，致使生長(zhǎng)較慢。 (3) 觀察時(shí)間的掌握。真菌生長(zhǎng)較慢，故需3d后才干觀察出結(jié)果。每天都要觀察結(jié)果。

微生物操作中罕見(jiàn)效果的討論與剖析

1、 劃線取得單個(gè)菌落的方法。劃不出單個(gè)菌落的緣由： (1) 平板上有過(guò)多的水分； (2) 劃線時(shí)接種環(huán)未經(jīng)重復(fù)灼燒； (3) 多區(qū)劃線，三區(qū)或四區(qū)劃線。

2、 涂布和傾注的區(qū)別：涂布利于觀察，但由于涂布棒上會(huì)帶有大批的菌液，影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性；涂布更為準(zhǔn)確，但不利于觀察菌落的形狀。

3、 培育基配制時(shí)應(yīng)留意的效果： (1) 滅菌溫度要嚴(yán)厲控制，依照要求滅菌，尤其含糖量較高的培育基溫度不應(yīng)太高，過(guò)高會(huì)招致糖分焦化，影響質(zhì)量； (2) 瓊脂培育基不能重復(fù)溶化。重復(fù)溶化會(huì)破壞培育基中的營(yíng)養(yǎng)成分； (3) 培育基不能重復(fù)滅菌，重復(fù)滅菌也會(huì)招致?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分的破壞； (4) 含瓊脂的培育基滅菌后，要搖勻。

4、 平板的保管：大少數(shù)平板如VRBA、DC、、尿素酶生化管、顯色系列等要避光高溫保管。

5、 產(chǎn)品的保管： (1) 干粉培育基：避光枯燥，結(jié)塊后不能運(yùn)用。 (2) 亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保管，運(yùn)用時(shí)，要常溫解凍，防止水浴加熱。 (3) 抗生素類(lèi)：冷藏保管，溫渡過(guò)高會(huì)招致靈敏度的下降。 (4) 兔血漿：冷藏保管大批的白色不會(huì)影響結(jié)果。

6、 觀察時(shí)間的掌握：按SN、GB等規(guī)范或培育基的運(yùn)用說(shuō)明所述時(shí)間停止觀察，時(shí)間過(guò)短或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，單菌落的特征都不會(huì)很清楚。如單增李斯特氏菌顯色培育基，時(shí)間短單菌落看不到卵磷脂環(huán)，時(shí)間長(zhǎng)綿羊李氏菌也會(huì)發(fā)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，李氏菌使整個(gè)平板成黑色，不利于觀察單個(gè)菌落。

7、 添加劑的添加： (1) 溫度的掌握。卵黃和抗生素類(lèi)添加的溫度都不應(yīng)太高。 (2) 定量。過(guò)多會(huì)抑制一些目的菌，太少又招致雜菌的過(guò)度生長(zhǎng)。

8、 培育溫度的掌握： (1) 真菌類(lèi)。25-28℃培育 (2) 細(xì)菌類(lèi)。李氏菌在增菌和生化中要求培育溫度在30℃左右。 (3) 其他普通在36℃左右

9、 接種方法：常用的方法主要有劃線、三點(diǎn)接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

10、革蘭氏染色方法：染色時(shí)間的掌握、沖洗的方法。

11、生化實(shí)驗(yàn)： (1) 接種的方法 (2) 氧化型和發(fā)酵型實(shí)驗(yàn)操作 (3) 陽(yáng)性菌種的對(duì)照 (4) 接種前的純化。挑取單個(gè)菌落停止一系列的生化。

12、關(guān)于殺菌的幾個(gè)概念： (1) 抑制：是在亞抑制劑量因子作用下招致微生物生長(zhǎng)中止，但在移去這些因子后生長(zhǎng)仍可以恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象。 (2 )死亡：在致死劑量因子的作用下或在亞致死劑量因子長(zhǎng)時(shí)間的作用下，招致微生物生長(zhǎng)才干不可逆喪失，即使移去這種因子后生長(zhǎng)仍不能恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象。 (3) 防腐：在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生長(zhǎng)的一種措施，它能防止食物糜爛或防止食物霉變。 (4) 消毒：應(yīng)用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中一切病原微生物的一種措施，它可以起到防止感染和傳達(dá)的作用。 (5) 滅菌：應(yīng)用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的一切病原微生物的一種措施。 (6) 化療：應(yīng)用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)，例磺胺、抗生素等對(duì)生物體外部被微生物感染的組織或病變細(xì)胞停止治療，以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細(xì)胞，但對(duì)無(wú)機(jī)體無(wú)毒害作用的治療措施。

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