該品系可用于NKT細(xì)胞相關(guān)的多種疾病及發(fā)育相關(guān)研究。

動(dòng)物模型的制備和應(yīng)用實(shí)驗(yàn)必須在具備相應(yīng)資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室開展。動(dòng)物模型的制備、應(yīng)用過程中的監(jiān)督管理、處置措施、對(duì)環(huán)境和生態(tài)影響等應(yīng)符合國(guó)家相關(guān)法律規(guī)定。

通過流式細(xì)胞儀對(duì)敲除小鼠的胸腺、脾臟和肝臟的NKT細(xì)胞進(jìn)行了分析，包括B220、CD3ξ，CD4，CD8α，TCRβ，相關(guān)的標(biāo)記購(gòu)買自BD公司。為驗(yàn)證該基因?qū)δ[瘤的抵抗作用，選取肝臟轉(zhuǎn)移的B16黑色素瘤，對(duì)小鼠進(jìn)行靜脈注射，同時(shí)選擇αGalCer-DC細(xì)胞注射作為另一實(shí)驗(yàn)組。

流式細(xì)胞儀分析，Traj18基因敲除小鼠的NKT細(xì)胞在胸腺、脾臟和肝臟都沒有表達(dá)：

接種腫瘤實(shí)驗(yàn)表明，該敲除小鼠對(duì)腫瘤的耐受能力下降:

背景小鼠：C57BL/6J

構(gòu)建信息：應(yīng)用CRISPR/Cas介導(dǎo)的基因組工程技術(shù)建立 Traj18基因敲除小鼠模型；小鼠Traj18基因(Gene ID: 100124371)位于小鼠14號(hào)染色體上，小鼠的Traj18基因?yàn)槟康奈稽c(diǎn)：

將構(gòu)建兩對(duì)gRNA靶向載體，并經(jīng)測(cè)序證實(shí)。體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的Cas9mRNA和gRNA將被共同注射到受精卵中，以促進(jìn)KO小鼠的產(chǎn)生。用PCR進(jìn)行仔鼠基因分型，然后進(jìn)行序列分析；將Traj18基因的gRNA和Cas9mRNA共注射到受精卵中，以產(chǎn)生有針對(duì)性的敲除后代。通過PCR鑒定F0代首建鼠，隨后進(jìn)行序列分析，然后與野生型小鼠繁殖獲得F1代，再進(jìn)行鑒定，F(xiàn)1代再進(jìn)行繁殖，最終獲得純合子小鼠。PCR反應(yīng)體系及條件為

天然殺傷T細(xì)胞（NKT）是T淋巴細(xì)胞的一個(gè)獨(dú)特的子集，它通過細(xì)胞因子的快速釋放和與免疫系統(tǒng)其它細(xì)胞直接作用來調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。因此NKT細(xì)胞作為先天和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)之間的重要聯(lián)系，是免疫療法的有前景的靶點(diǎn)。I型NKT細(xì)胞，也稱iNKT細(xì)胞，是小鼠中最常見的NKT細(xì)胞，在人類中具有相似的特性。

TRAJ18基因與TRAv11基因結(jié)合，形成具有適當(dāng)抗原特異性的iNKT細(xì)胞受體（Tcr）。有報(bào)道指出敲除TRAJ18基因的小鼠，約60%的TCRα多樣性缺乏。

參考文獻(xiàn)：

1. Lower TCR repertoire diversityin Traj18-deficient mice.

2. Generation of NovelTraj18-Deficient Mice Lacking Vα14 Natural Killer T Cells with an Undisturbed TCell Receptor α-Chain Repertoire.

3. Mutation of the Traj18 genesegment using TALENs to generate Natural Killer T cell deficient mice.